Pipetit ovat laboratoriolaitteita, joita käytetään hyvin pienien nestemäärien mittaamiseen ja siirtämiseen. Pipetin mittausten tarkkuus on erittäin tärkeää, koska pipetin pudottaman tilavuuden erot voivat vaikuttaa kokeisiin. Tarkkuuden varmistamiseksi on tärkeää tarkistaa pipetin kalibrointi muutaman kuukauden välein. Kalibrointiprosessista on hyötyä tarkistettaessa, tippuuko laitteesta nestettä oikeaan tilavuuteen, jotta korjaukset voidaan tehdä tarvittaessa.
Vaihe
Osa 1/2: Kalibroinnin tarkistaminen
Vaihe 1. Kerää tarvittavat materiaalit
Pipetin kalibroinnin tarkistamiseksi tarvitaan pipetti, pipetinkärjet, tislattu vesi, dekantterilasi, lämpömittari, vaaka ja punnituskuppi. Käytettävän vaa'an on oltava mikrogramman mittakaavassa mikropipetin kalibroimiseksi enintään 1 litralla.
- Et tarvitse enempää kuin 5 ml vettä. Täytä dekantterilasi vedellä.
- Varmista, että pipetin kärki on oikea ja sopii tiukasti pipettiin.
Vaihe 2. Mittaa tislatun veden lämpötila
Laita lämpömittari veteen ja anna sen istua vähintään minuutin ajan. Jos lämpömittarin punainen viiva liikkuu edelleen, odota minuutti. Merkitse lämpötila minuutin kuluttua muistiin. Ota lämpömittari ja kuivaa se, kun olet valmis.
Veden lämpötila on tärkeä tietää, koska sitä käytetään kalibroinnin tarkistamiseen tehtävissä laskelmissa
Vaihe 3. Aseta punnituskuppi vaakaan ja nollaa vaaka
Ihannetapauksessa käytetyssä vaa'assa on ovi ja eristetty tila sisällä. Aseta punnituskuppi vaakakammioon ja sulje luukku. Jos vaakaasi ei sisällä koteloa ja ovea, aseta vaaka vaa'alle. Paina”Zero” tai “Tare” -painiketta ja odota, kunnes asteikko näyttää nollaa.
Vaa'an nollaaminen vähentää muovikupin painoa ja voit punnita vain kupissa olevan aineen painon
Vaihe 4. Valmistele pipetti kalibrointia varten
Pyyhi pipetti etanolilla ennen aloittamista ja varmista, ettei mikään tukkeuta pipetin kärkeä. Kiinnitä oikea pipettikärki pipetin kärkeen ja määritä testattava tilavuus.
Testaa kalibrointia varten pienimmät ja suurimmat tilavuudet, jotka voidaan poistaa pipetistä
Vaihe 5. Pese pipetin kärki ennen sen kalibrointia
Paina painiketta ensimmäiseen rajaan asti ja upota pipetin kärki tislattuun veteen noin 2 mm: n syvyyteen. Vapauta painike imeäksesi osan nesteestä ja vapauta sitten neste uudelleen painamalla painiketta. Toista tämä vaihe kolme kertaa pestäksesi tiputuskärjet ennen käyttöä.
Paina painiketta toiseen rajaan asti poistaaksesi jäljellä oleva neste pipetin kärjestä ja poista pipetti vedestä
Vaihe 6. Ota kalibrointitilavuus
Kun pipetin kärki on tislatun veden ulkopuolella, paina painiketta ensimmäiseen rajaan asti. Upota pipetin kärki 2 mm syvälle tislattuun veteen ja vapauta painike imemään neste pipetin kärkeen. Odota noin 1 sekunti ennen kuin irrotat tiputinkärjen vedestä.
Varmista, että pipetin kärki on täysin upotettuna aspiraatioprosessin aikana. Tiputinkärjessä ei saa olla kuplia tai tulos voi olla väärä
Vaihe 7. Kaada neste vaa'an punnitusastiaan
Aseta pipetin kärki punnitusastian pohjalle ja paina pipetin painiketta ensimmäiseen rajaan asti. Siirry toiseen pisteeseen, hieman kauemmas vedestä, ja paina sitten painiketta toiseen rajaan. Pidä painiketta painettuna ja nosta pipetin kärki punnituskupista.
Pidä kärki kiinni pipetissä, koska käytät sitä uudelleen joissakin muissa kalibrointitesteissä
Vaihe 8. Kirjaa vaakaan merkitty paino
Sulje tasapainotuskopin ovi, jos käytät ovivaakaa. Odota, kunnes numerot eivät enää muutu. Kirjoita muistikirjaasi.
On tärkeää odottaa, kunnes asteikon numerot eivät muutu uudelleen, ennen kuin kirjoitat ne muistiin. Muistiinpanot menevät pieleen, jos et odota
Vaihe 9. Toista tämä prosessi suorittaaksesi lukemisen vähintään 10 kertaa
Nollaa vaaka uudelleen, pese pipetin kärjet ennen käyttöä, ime sama määrä nestettä, poista tilavuus ja kirjaa paino. Kirjaa tislatun veden paino samalle tilavuudelle ja keskitä sitten kaikki muistiinpanosi.
Voit toistaa tämän prosessin eri tilavuuksille, jos jokainen tilavuus testataan useita kertoja
Osa 2/2: Kalibrointituloksen laskeminen
Vaihe 1. Määritä lasketun tilavuuden kaava
Kaava pipetin poistaman nesteen tilavuuden laskemiseksi on V = w * Z, w on veden paino, Z on veden tiheyteen perustuva muuntokerroin, kun taas V on vesimäärän tilavuus poistettu.
- Muuttuja Z voidaan saada laskemalla veden tiheys käyttämällä kokeen alussa tallennettua lämpötilaa.
- Esimerkiksi: Jos veden lämpötila on 23 ° C, Z -arvo on 1,0035 g/mg.
Vaihe 2. Laske pipetin kalibrointien keskiarvo
Pipetistä vapautuneen veden määrä on punnittu vähintään kymmenen kertaa. Jos haluat keskittää kaikki nämä arvot, lisää ne yhteen ja jaa kymmenellä. Jos teit enemmän tai vähemmän prosessista, laske yhteen kokonaistulokset ja jaa sitten suoritettujen kokeiden lukumäärällä.
- Esimerkiksi: Veden paino 10 µl pipetillä suoritetuista 10 kokeesta on seuraava: 9, 89, 10, 01, 10, 02, 9, 99, 9, 95, 10, 04, 9, 96, 10, 01, 9, 99 ja 9, 98.
- Keskiarvo on: (9, 89 + 10, 01 + 10, 02 + 9, 99 + 9, 95+ 10, 04 + 9, 96 + 10, 01 + 9, 99 + 9, 98)/10 = 99, 84/10 = 9984
Vaihe 3. Liitä muuttujat yhtälöön ja ratkaise
Kun olet määrittänyt kullekin muuttujalle oikean numeron, liitä se kaavaan ja suorita laskettu tilavuus. Voit ratkaista tämän yhtälön yksinkertaisesti kertomalla kaikkien kokeiden keskipainon Z -arvolla.
Esimerkiksi: V = w * Z = 9984 * 1,0035 = 10, 019
Vaihe 4. Laske pipetin tarkkuus
Käytä yhtälöä A = 100 x Vkeskim/V0 pipetin tarkkuuden laskemiseksi. A osoittaa pipetin tarkkuuden, Vkeskim on laskettu keskimääräinen tilavuus ja V0 on pipetille asetettu arvo. Tarkkuusarvon tulisi olla 99-101%.
- Jos pipetti on kalibroitu oikein, lasketun arvon tulee olla hyvin lähellä pipetille asetettua todellista arvoa.
- Esimerkiksi: A = 100 x Vkeskim/V0 = 100 x 10, 019/10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
- Tämä pipetti on kalibroitu oikein.
Vaihe 5. Lähetä tarvittaessa pipetti kalibroitavaksi
Jos pipetti ei läpäise kalibrointitestiä, älä käytä sitä kokeiluun juuri nyt. Pipetit ovat erittäin herkkiä ja kalliita laboratoriolaitteita. Et voi korjata kalibrointia itse, pipetti on lähetettävä korjattavaksi. Vaihtoehtoisesti useat yritykset tulevat laboratorioon ja kalibroivat pipetin paikan päällä.
