Kemia, laimennus on prosessi, jolla vähennetään aineen pitoisuutta liuoksessa. Ketjulaimennus on liuoksen toistuva laimennus laimennuskertoimen nopeaksi lisäämiseksi. Tämä menettely suoritetaan yleensä kokeissa, jotka vaativat erittäin laimeita liuoksia suurella tarkkuudella. Esimerkiksi kokeet, joihin liittyy pitoisuuskäyrät logaritmisella asteikolla tai kokeet bakteerien tiheyden määrittämiseksi. Ketjulaimennoksia käytetään laajalti tieteellisissä kokeissa, kuten biokemiassa, mikrobiologiassa, farmakologiassa ja fysiikassa.
Vaihe
Menetelmä 1/2: Peruslaimennuksen suorittaminen
Vaihe 1. Määritä sopiva laimennusliuos
On erittäin tärkeää määrittää laimennukseen käytettävä neste. Monet liuokset liukenevat tislattuun veteen, mutta näin ei aina ole. Jos laimennat bakteereja tai muita soluja, tee se viljelyalustalla. Valitsemaasi nestettä käytetään kaikkiin ketjun laimennuksiin.
Jos olet epävarma, mitä laimenninta käytät, etsi apua tai katso netistä. Etsi esimerkkejä muilta, jotka ovat tehneet samanlaisia ketjun laimennuksia
Vaihe 2. Valmista useita koeputkia, jotka sisältävät 9 ml laimenninta
Koeputkia käytetään tyhjiin laimennoksiin. Laita ensin laimentamaton näyte ensimmäiseen putkeen ja tee laimennukset peräkkäin seuraaviin putkiin.
- Merkitse kaikki käytetyt putket ennen laimennuksen aloittamista, jotta et hämmenny kokeilun aikana.
- Jokainen putki täytetään 10 laimennoksella alkaen putkesta, jonka ainetta ei ole laimennettu. Laimennus ensimmäisessä putkessa on 1:10, jota seuraa 1: 100 toisessa putkessa, 1: 1000 kolmannessa ja niin edelleen. Määritä suoritettavan laimennuksen määrä etukäteen, jotta et tuhlaa laimennusliuosta.
Vaihe 3. Valmistele koeputki, joka sisältää vähintään 2 ml laimentamatonta liuosta
Tämän ketjun laimennuksen suorittamiseen tarvittava laimennettavan liuoksen vähimmäismäärä on 1 ml. Jos käytät vain 1 ml, laimentamatonta liuosta ei ole jäljellä. Merkitse BLM laimentamattomille liuoksille.
Sekoita liuos huolellisesti ennen laimentamisen aloittamista
Vaihe 4. Suorita ensimmäinen laimennus
Ota 1 ml laimentamatonta liuosta BLM -koeputkesta pipetillä ja laita se koeputkeen 1:10, joka sisältää 9 ml laimenninta, ja sekoita sitten huolellisesti. Nyt on 1 ml laimentamatonta liuosta 9 ml: ssa laimenninta. Siten liuos on laimennettu laimennuskertoimella 10.
Vaihe 5. Suorita toinen laimennus
Toista laimennusta varten ota 1 ml liuosta 1:10 -putkesta ja laita se sitten 1: 100 -putkeen, joka sisältää myös 9 ml laimenninta. Varmista, että 1:10 putken liuos on täysin sekoittunut, ennen kuin lisäät sen seuraavaan putkeen. Varmista jälleen kerran, että laimennus 1: 100 -putkeen on täysin sekoitettu. 1:10 putken liuos laimennettiin 10-kertaiseksi 1: 100-putkeen.
Vaihe 6. Jatka tätä menettelyä suorittaaksesi pidempiä ketjun laimennuksia
Tämä prosessi voidaan toistaa niin monta kertaa kuin on tarpeen halutun liuospitoisuuden saavuttamiseksi. Kokeissa, joissa käytetään pitoisuuskäyriä, voit suorittaa ketjun laimennuksia useiden liuosten tuottamiseksi laimennoksilla 1, 1:10, 1: 100, 1: 1000.
Menetelmä 2/2: Laimennuskertoimen ja lopullisen pitoisuuden laskeminen
Vaihe 1. Laske ketjun laimennoksen viimeisen laimennoksen suhde
Laimennussuhde voidaan määrittää kertomalla laimennuskerroin jokaisesta vaiheesta viimeiseen vaiheeseen. Matemaattinen kuva on kaavalla Dt = D1 x D2 x D3 x… x D , Dt on kokonaislaimennuskerroin ja D on laimennussuhde.
- Oletetaan esimerkiksi, että laimennat 1:10 4 kertaa. Liitä laimennustekijä kaavaan: Dt = 10 x 10 x 10 x 10 = 10000
- Tämän ketjun laimennoksen neljännen putken laimennustekijä on 1: 10000. Aineen pitoisuus laimennuksen jälkeen on 10 000 kertaa pienempi kuin ennen laimentamista.
Vaihe 2. Määritä liuoksen konsentraatio laimentamisen jälkeen
Jotta voit määrittää liuoksen lopullisen pitoisuuden ketjulaimennuksen jälkeen, sinun on tiedettävä sen alkuperäinen pitoisuus. Kaava on Cloppuun = Calku/DCloppuun on laimennetun liuoksen lopullinen pitoisuus, Calku on alkuperäisen liuoksen alkukonsentraatio ja D on ennalta määrätty laimennussuhde.
- Esimerkki: Jos aloitat soluliuoksella, jonka pitoisuus on 1 000 000 solua millilitrassa ja laimennussuhde on 1 000, mikä on laimennetun näytteen lopullinen pitoisuus?
-
Käyttämällä kaavaa:
- Cloppuun = Calku/D
- Cloppuun = 1.000.000/1.000
- Cloppuun = 1000 solua millilitrassa.
Vaihe 3. Varmista, että kaikki yksiköt ovat samat
Kun suoritat laskelmia, varmista, että yksiköt ovat aina samat laskennan lopussa. Jos alkuperäinen yksikkö on soluja / ml, varmista, että yksiköt pysyvät samoina laskennan lopussa. Jos alkuperäinen pitoisuus on miljoonasosia (bpd), lopullisen pitoisuuden on oltava myös bpj -yksikköä.
